نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

• مسعود حیدری زاده ¹
• فریبا حسن وند ²

¹ استادیار گروه علوم زیستی، دانشکده علوم، دانشگاه کردستان

² دانشجوی کارشناسی ارشد سلولی مولکولی گروه علوم زیستی، دانشکده علوم ،دانشگاه کردستان

چکیده

مهارکننده‌های آنزیمی ترکیباتی پروتئینی هستند که گیاهان در برابر آفت‌ها و عوامل بیماری­زا تولید می‌کنند. این پروتئین­ها غالباً در بذر­ها یافت شده و با بازدارندگی تغذیه­ایی برای گیاه نقش دفاعی دارند. در این پژوهش پروتئین­های بذر لوبیای قرمز واریته‌ی صیاد Phaseolusvulgaris, L. به منظور ارزیابی بازدارندگی آنها بر فعالیت آلفا آمیلاز قارچ Aspergillus oryzae, S.  جداسازی، خالص سازی و ویژگی آنها مطالعه گردید.پروتئین­های استخراج شده با درصدهای اشباع %(30-0)، %(60-30) و %(100-60) از نمک آمونیوم سولفات رسوب داده شدند. به ‌منظور برداشته شدن آمونیوم سولفات دیالیز انجام شد.مهارکنندگی هر یک از نمونه‌های پروتئینی حاصلهبر فعالیت آلفاآمیلاز oryzaeAspergillus بر اساس روش استاندارد شده  و با  استفاده از معرف لوگل  انجام شد. نتایج نشان داد تنها پروتئین­های رسوب یافته در غلظت ‌ %(60-30) اشباع از آمونیوم سولفات دارای فعالیت مهارکنندگی  در برابر آلفاآمیلاز مورد مطالعه هستند. مهارکنندگی این فرکشن 32/89  درصد محاسبه گردید. به منظور تعیین ویژگی­های این مهارکننده‌ها آنالیز HPLC و SDS-PAGE انجام گردید. با سنجش اثر این مهارکننده‌ها بر روی آلفاآمیلاز بزاقی و پانکراسی شاید بتوان از این مهارکننده‌ها همچون مهارکننده‌های آلفاگلوکوزیدازی آکاربوز و میگلیتول برای درمان دیابت نوع دو غیر وابسته به انسولین استفاده کرد. در کشاورزی نیز می‌توان با ایجاد گیاهان تراریخته که مهارکننده‌های آمیلازی را بیان می‌کنند، گیاهان مقاوم به آفت تولید کرد.

کلیدواژه‌ها

• آلفا آمیزز قارچ آستییرییلوس اریتزا
• پتروتئین هتای
• برر
• خال سازی نسبی
• لوبیای قرمز
• مهارکننده های آلفاآمیززی

عنوان مقاله [English]

Study of the characteristics and effects of amylase inhibitors present in the seeds of the red bean Phaseolus vulgaris

نویسندگان [English]

• Masuod Haidarizadeh ¹
• Fariba Hasanvand ²

¹ Professor, Department of Biological Sciences and Biotechnology, Faculty of Basic sciences, University of Kurdistan, Sanandaj, Iran

² Assistant Professor, Faculty of Basic sciences, University of Kurdistan, Sanandaj, Iran

چکیده [English]

Cereal and legume kernels contain many α-amylase inhibitors which have the potential to inhibit the α-amylase activity from various sources. The subject of this study was the partial purification of α-amylase inhibitors of red bean seeds. To this end, extractions were carried out in three parts with different saturation percentages of ammonium sulfate. Iin order to remove ammonium sulfate and monitor the inhibitory activity of the extracts on Aspergillus oryzae α-amylase, dialysis was carried out. By assaying the rate of inhibitory activity of each sample on the basis of their absorbance in 540 nm and comparison to absorbance of negative control, it was observed that only (30-60)% fraction of each extract had inhibitory activity on the α-amylase. Inhibitory effect of these fractions for red bean extract were calculated to be 89.32 %. For further characterization of these inhibitors, HPLC and SDS-PAGE analyses were carried out. By assaying the activity of these inhibitors on other α-amylases such as salivary and pancreatic α- amylases, it may be feasible to use these- amylase inhibitors similar to other inhibitors such as Acarbose and Miglitol, for the treatment of type II diabetes. The results may also be applicable in agriculture in the design of transgenic plants that express α-amylase inhibitors against α-amylases of pests.

کلیدواژه‌ها [English]

• α-amylase inhibitors
• Partial purification
• Seed proteins
• Red bean
• kernel
• Aspergillus oryzae α-amylase inhibitor