نوع مقاله : مقاله پژوهشی
نویسندگان
1 . فارغ التحصیل کارشناسی ارشد زیست شناسی – ژنتیک ملکولی، گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، پردیس خودگردان، دانشگاه زابل، زابل، ایران
2 دانشیاربیولوژی ملکولی، واحد سلولی و ملکولی، گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه زابل، زابل، ایران
چکیده
مقدمه: سرطان پستان دارای بیشترین نرخ ابتلا به سرطان در زنان است. در این پژوهش برای اولین بار فعالیت سیتوتوکسیک عصاره هیدرو الکلی میوه زرشک بر روی سلول های سرطانی رده MCF-7 بررسی گردید.
مواد و روشها: در این مطالعه آزمایشگاهی، سلول هایMCF-7 درغلظتهای مختلف عصاره میوه زرشک (۲۵/۳۱، ۵/۶۲، ۱۲۵، ۲۵۰، ۵۰۰، ۱۰۰۰و۲۰۰۰ میکروگرم در میلی لیتر) ۲۴ ساعت انکوبه و میزان سمیت سلولی با روش MTT، آپوپتوزیس با روش فلوسیتومتری، تغییرات مورفولیژیکی توسط میکروسکوپی فلورسانس با استفاده از رنگ هوخست ، بیان ژنهای TP53 و MDM4 با روش ریل تایم پی سی آر˛ فعالیت کاسپازهای ۳ و ۸ و ۹ توسط روش رنگ سنجی مورد بررسی قرار گرفت. تفسیرنتایج با آزمون آنالیز واریانس یک طرفه انجام شد.P < 0.05 معنی دار گزارش گردید.
نتایج: اثر عصاره میوه زرشک برروی سلولهای MCF-7 وابسته به دوز بوده و بیشترین تاثیر عصاره در غلظت ۲۰۰۰ میکروگرم در میلی لیتر در مدت ۲۴ ساعت رخ داده است (١٦٨١میکروگرم در میلی لیتر=IC50 ). نتایج نشان داد میزان بیان نسبی ژنهای P53 و MDM4 در مقایسه با گروه کنترل (غیر تیمار) افزایش معنی داری داشت (P < 0.001). درصد سلولهای آپوپتوزی بیش از٨١ برابر نسبت به گروه کنترل (غیر تیمارشده) افزایش یافت. فعالیت کاسپازهای ۳ و ۸ و ۹ در سلولهای MCF-7 تیمار شده افزایش یافت (P < 0.001).
نتیجه گیری: عصاره میوه زرشک در غلطتهای معین موجب کاهش رشد سلولی و افزایش القای آپوپتوزیس در سلول های MCF-7 می شود. عصاره میوه زرشک توانایی ضد سرطانی در درمان سرطان سینه دارد.
کلیدواژهها
عنوان مقاله [English]
Cytotoxic effect of hydroalcoholic extract of Berberis vulgaris fruit extract on MCF-7 human breast cancer cells
نویسندگان [English]
- Zohreh Mirbahaaldin 1
- Gholamreza Motalleb 2
1 M.Sc. Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Campus of University, University of Zabol, Zabol, I.R. of Iran
2 Associate Professor, Division of Cell and Molecular Biology, Department of Biology, Faculty of Science, University of Zabol, Zabol, I.R. of Iran
چکیده [English]
Introduction: Breast cancer has the highest cancer incidence in women. The cytotoxic activity of Berberis vulgaris fruit extract on MCF-7 cancer cells was investigated for the first time in this study. Materials and methods: In this experimental study, MCF-7 cancer cells were incubated in different concentrations of barberry fruit extract (31.25, 62.5, 125, 250, 500, 1000, and 2000 μg/ml) for 24 hours, and the cytotoxicity level with the MTT method, apoptosis by flow cytometry method using the annexin V/FITC/PI kit, morphological changes by fluorescence microscopy using Hoechst dye, expression of TP53 and MDM4 genes by real-time PCR method, and the activity of caspases 3 and 8 and 9 were analyzed by the colorimetric method. The interpretation of the results was made with a one-way analysis of variance. P < 0.05 was reported as significant. Results: The effect of barberry fruit extract on MCF-7 cells was dose-dependent, and the highest effect of the extract occurred at a concentration of 2000 μg/ml in 24 hours (IC50 = 1681 μg/ml). The results showed that the relative expression of P53 and MDM4 genes increased significantly compared to the control group (untreated) (P<0.001). The percentage of apoptotic cells increased more than 81 times compared to the control group (untreated) (P<0.001). The activity of caspases 3 and 8, and 9 increased in treated MCF-7 cells (P<0.001). Conclusion: Barberry fruit extract in specific doses reduces cell growth and increases the induction of apoptosis in MCF-7 cancer cells. Barberry fruit extract has anti-cancer properties in breast cancer treatment.
کلیدواژهها [English]
- Apoptosis
- Berberis vulgaris fruit extract
- MDM4
- TP53
- Caspase
- MCF-7