بیوتکنولوژی
داود صادقی؛ مصطفی بخشی؛ میر مرتضی سادات ابراهیمی؛ شهرام نظریان؛ مهدی زین الدینی
چکیده
مقدمه: ریسین یک سم گلیکوپروتئینی در گیاه کرچک می باشد که از دو زنجیره A (RTA) و B (RTB) تشکیل شده است. دو کاندید واکسن پروتئینی بر پایه زنجیره A شامل RiVax و RVEc بر مقابله با مسمومیت ناشی از این سم وجود دارد. اگرچه مطالعات مختلفی در مورد قدرت ایمنی زایی RiVax به تنهایی و با کمک ادجوانت انجام شده اما سیستمهای با قابلیت رهایش کنترل شده نوین مانند نانوذرات، ...
بیشتر
مقدمه: ریسین یک سم گلیکوپروتئینی در گیاه کرچک می باشد که از دو زنجیره A (RTA) و B (RTB) تشکیل شده است. دو کاندید واکسن پروتئینی بر پایه زنجیره A شامل RiVax و RVEc بر مقابله با مسمومیت ناشی از این سم وجود دارد. اگرچه مطالعات مختلفی در مورد قدرت ایمنی زایی RiVax به تنهایی و با کمک ادجوانت انجام شده اما سیستمهای با قابلیت رهایش کنترل شده نوین مانند نانوذرات، جهت بهبود ایمنیزایی این پروتئین تا امروز مورد استفاده قرار نگرفته است. هدف از این مطالعه ساخت نانوذرات پلیلاکتیک-کو-گلایکولیکاسید(PLGA) حاوی RiVax با سرعت رهایش آهسته و ارزیابی پارامترهای فیزیکوشیمیایی و پتانسیل ایمنیزایی این سیستم در مقایسه با پروتئین تنها میباشد. روشها: ابتدا پس از خالصسازی RiVax، از روش امولسیون آب-روغن-آب برای بارگذاری RiVax در نانوذرات PLGA استفاده شد. پس از بررسی ویژگیهای فیزیکوشیمیایی نانوذرات حاوی RiVax، آنها به گروههای مختلف موشی تجویز شدند. یافتهها: نتایج نشان دهنده این بود که با توجه به استفاده از پلیمر PLGA با نسبت پلی لاکتیک اسید بیشتر نسبت به پلی گلایکولیک اسید، الگوی آزادسازی پروتئین از نانوذره آهسته بود (12 درصد پروتئین در 40 روز) و نتایج ایمنسازی تفاوتی در پاسخ ایمنی نانوذرات حاوی RiVax نسبت به RiVax تنها نشان نداد. نتیجهگیری: با وجود تحقیقات مختلف و نتایج مثبت در ارتباط با ماهیت ارتقاء ایمنیزایی توسط نانوذرات PLGA یکی از عوامل مهم در ارتقاء ایمنیزایی این نانوذرات نسبت اسید لاکتیک به اسید گلیکولیک تشکیل دهنده PLGA می باشد که تأثیر قابل توجهی بر میزان آزادسازی آنتی ژن و یا بر پاسخ ایمنی دارد.
بیوتکنولوژی
فائزه حبیب الهی؛ آزاده لهراسبی نژاد؛ اکبر حسینی پور
چکیده
مقدمه: پپتیدهای ضد باکتریایی به طور گسترده به عنوان آنتی بیوتیکهای زیستی بالقوه علیه باکتریها مورد بررسی قرار گرفتهاند. با این حال، تخریب پروتئولیتیک و تغییرات ساختاری ممکن است منجر به کاهش فعالیت ضد باکتریایی آنها شود. محصور شدن پپتیدها در لیپوزوم می تواند روش موثری برای رفع این گونه مشکلات باشد. روشها: دراین مطالعه CAP18 نوترکیب ...
بیشتر
مقدمه: پپتیدهای ضد باکتریایی به طور گسترده به عنوان آنتی بیوتیکهای زیستی بالقوه علیه باکتریها مورد بررسی قرار گرفتهاند. با این حال، تخریب پروتئولیتیک و تغییرات ساختاری ممکن است منجر به کاهش فعالیت ضد باکتریایی آنها شود. محصور شدن پپتیدها در لیپوزوم می تواند روش موثری برای رفع این گونه مشکلات باشد. روشها: دراین مطالعه CAP18 نوترکیب (rCAP18) به عنوان یک پپتید ضد باکتریایی، پس از تولید و خالص سازی، درون لیپوزومهای حاوی فسفاتیدیل کولین محصور شد. ویژگیهای اصلی لیپوزومها مانند سنجش گروههای عاملی، اندازه، کارایی کپسولاسیون و مورفولوژی آن بررسی شد. فعالیت ضد باکتریایی rCAP18 آزاد و محصور در لیپوزوم (Lipo@rCAP18) علیه باکتریهای Escherichia coli، Pseudomonas aeruginosa، Xanthomonas citri subsp. citri و Staphylococcus aureus بر اساس اندازه گیری پارامترهای MIC و MBC ارزیابی و مقایسه شد. نتایج و بحث: یافتههای بدست آمده نشان دادند که کمترین غلظت مهارکنندگی rCAP18 (حالت آزاد) برای سویه E. coli، P. aeruginosa ، X. citri و S. aureus به ترتیب معادل 135، 101، 80 و بیشتر از 320 میکروگرم بر میلیلیتر تعیین شد. مقادیر MIC مربوط به rCAP18 محصور در لیپوزوم برای باکتریهای ذکر شده در بالا به ترتیب بیشتر از 320، 135، 180 و 320 میکروگرم بر میلیلیتر بدست آمد. مقایسه نتایج مربوط به MIC نشان داد کهrCAP18 در حالت آزاد و یا به فرم Lipo@rCAP18 تاثیر بازدارندگی بیشتری علیه باکتریهای P. aeruginosa و X. citri دارد. بنابراین، وزیکولهای حاوی پپتیدهای ضد باکتریایی می توانند بعنوان ابزار قدرتمندی جهت حفظ عملکرد و نگهداری پپتیدهای فعال طی زمان به کار روند.
بیوتکنولوژی
مریم سلطانی؛ مرتضی یوسف زادی؛ نرگس امراللهی بیوکی؛ موسی کشاورز؛ عبدالمجید میرزاعلیان دستجردی
چکیده
مدیریت صحیح زائدات ماهی در صنعت ماهیگیری و فرآوری اهمیت بالایی دارد. بنابراین، ارائه روش و استراژیها موثر برای مدیریت زائدات ضروری است. کمپوست حاوی مواد مغذی به عنوان یکی از روشهای مناسب در نظر گرفته شدهاست. در این راستا، هدف از این پژوهش تاثیر کمپوست زائدات ماهی به عنوان یک کود سازگار با محیط زیست بر رشد و عملکرد گیاه مدل تربچه ...
بیشتر
مدیریت صحیح زائدات ماهی در صنعت ماهیگیری و فرآوری اهمیت بالایی دارد. بنابراین، ارائه روش و استراژیها موثر برای مدیریت زائدات ضروری است. کمپوست حاوی مواد مغذی به عنوان یکی از روشهای مناسب در نظر گرفته شدهاست. در این راستا، هدف از این پژوهش تاثیر کمپوست زائدات ماهی به عنوان یک کود سازگار با محیط زیست بر رشد و عملکرد گیاه مدل تربچه قرمز، تاثیر آن برروی فعل و انفعالات فلزات سنگین و فعالیت آنزیمی کاتالاز بود.دو آزمایش با ۳ تیمار و سه تکرار در شرایط گلخانه و گلدان انجام شد. در آزمایش اول تاثیر کمپوست 20 و 50 درصد بر روی صفات مورفولوژیکی گیاه تربچه مورد بررسی قرار گرفت و در آزمایش دوم کمپوست 50 درصد با توجه به صفات مورفولوژی گیاه انتخاب شد و خصوصیات فعالیت آنزیم کاتالاز و حذف فلز سنگین مورد سنجش قرار گرفت. نتایج و بحث: نتایج نشان داد که استفاده از کمپوست با درصد ۵۰، منجر به بهبود وزن تر و خشک برگ، غده و میزان پرولین(5، 05/0، 6/6، 91/1 گرم و 65/1 µ mol g-1DW) گیاه شد. همچنین، کمپوست ۵۰ درصد باعث کاهش فعالیت فلز کادمیوم (21/0 میلی گرم بر کیلوگرم) و افزایش فعالیت آنزیمی کاتالاز(34 میکرومول پراکسید هیدروژن بر گرم-ساعت) شد. استفاده از کمپوست زائدات ماهی میتواند بهبود خاک و کاهش فعل و انفعالات فلزات سنگین را در کشاورزی ایجاد کند. براساس این نتایج کمپوست 50 درصد زائدات ماهی میتواند شرایط حاصلخیزی و کاهش فعل و انفعالات فلزات سنگین را جهت آماده سازی خاک برای رشد گیاهان را فراهم کند.
بیوتکنولوژی
لیلا داوروش؛ مقصود پژوهنده؛ محمد احمدآبادی
چکیده
مقدمه: آنزیم RNA پلیمراز باکتریوفاژ T7، در رونویسی و بیان پروتئینهای نوترکیب استفاده میشود. این آنزیم به فاکتور دیگری برای شناسایی پیشبر نیاز نداشته، بسیار اختصاصی عمل میکند و فقط ژنهای تحت کنترل پیشبر T7 را بیان می-نماید. این ویژگیها موجب شده است که تولید آنزیم T7 RNA پلیمراز در بیوتکنولوژی بسیار پر اهمیت باشد.مواد و روشها: در این ...
بیشتر
مقدمه: آنزیم RNA پلیمراز باکتریوفاژ T7، در رونویسی و بیان پروتئینهای نوترکیب استفاده میشود. این آنزیم به فاکتور دیگری برای شناسایی پیشبر نیاز نداشته، بسیار اختصاصی عمل میکند و فقط ژنهای تحت کنترل پیشبر T7 را بیان می-نماید. این ویژگیها موجب شده است که تولید آنزیم T7 RNA پلیمراز در بیوتکنولوژی بسیار پر اهمیت باشد.مواد و روشها: در این تحقیق، برای تولید انبوه و کم هزینه این آنزیم، سویه باکتریوفاژ T7 بهعنوان الگو مورد استفاده قرار گرفت. واکنش PCR با استفاده از آغازگرهای اختصاصی که حاوی سایت برشی برای آنزیمهای BamHI و EcoRI بود انجام گرفت. پس از الکتروفورز محصول PCR، ژن تکثیر شدهT7 RNA پلیمیراز و پلاسمید pGEX2TK توسط این آنزیمها برش داده شدند و پس از خالصسازی، واکنش لیگاسیون بین آنها صورت گرفت. پلاسمید نوترکیب pGEX-T7RNAPol با الکتروپوراسیون به باکتری E. coli منتقل شد. گزینش باکتریهای حاوی پلاسمید نوترکیب به کمک PCR انجام گرفت. نتایج: پس از تایید پلاسمید حاصل، با برش آنزیمی و همچنین با PCR، توالییابی آن انجام و درستی آن مطابق توالی ثبت شده در NCBI تایید شد. پلاسمید نوترکیب به منظور بیان پروتئین مورد نظر به باکتری E. coli سویه Rosetta منتقل شد. کلنی حاوی پلاسمید انتخاب وکشت شد. بیان پروتئین با القای IPTG در باکتری صورت گرفت و پس از استخراج به کمک SDS-PAGE تایید شد. این تحقیق پیشنیاز تولید تجاری و انبوه آنزیم T7 RNA پلیمراز میباشد که پس از بهینهسازی بیان و خالصسازی پروتئین، تولید تجاری و بومی آن انجام خواهد شد.
بیوتکنولوژی
مراحم آشنگرف؛ سمیه فتاحی
چکیده
چکیدهمقدمه: نانوذرات نقره به دلیل اندازه کوچک آنها و خصوصیات فیزیکی و شیمیایی منحصر به فرد، در بسیاری از صنایع مانند پوششدهی، ضدعفونی کننده، تصفیه آب و همچنین در پزشکی استفاده میشوند. سنتز زیستی برون سلولی نانوذرات نقره با استفاده از سیستم قارچی، یک روش مناسب برای جلوگیری از استفاده از مواد شیمیایی است. هدف از این مطالعه، سنتز ...
بیشتر
چکیدهمقدمه: نانوذرات نقره به دلیل اندازه کوچک آنها و خصوصیات فیزیکی و شیمیایی منحصر به فرد، در بسیاری از صنایع مانند پوششدهی، ضدعفونی کننده، تصفیه آب و همچنین در پزشکی استفاده میشوند. سنتز زیستی برون سلولی نانوذرات نقره با استفاده از سیستم قارچی، یک روش مناسب برای جلوگیری از استفاده از مواد شیمیایی است. هدف از این مطالعه، سنتز زیستی برون نانوذرهی نقره توسط سلول در حال استراحت سویهی بومی قارچی Aspergillus niger ZRS14 و بهینه سازی فرآیند سنتز به روش آماری تاگوچی میباشد. روشها: اثر پارامترهای زیست توده، زمان گرماگذاری، pH و غلظت نیترات نقره در سه سطح با استفاده از نرم افزار Qualitek-4 انجام شد. تعیین ویژگی نانوذرات نقره سنتز شده توسط آنالیزهای طیف سنجی شامل طیف سنجی UV-Vis، طیف پراش اشعه ایکس (XRD)، طیفسنجی تبدیل فوریه مادون قرمز(FTIR) و میکروسکوپ الکترونی روبشی گسیل میدانی (FESEM) انجام شد. نتایج و بحث: نتایج نشان داد سویهی مذکور تحت شرایط بهینه شامل غلظت ۲ میلی مولار نیترات نقره، pH برابر ۶، دمای برابر 32 درجهی سلسیوس و پس از 72 ساعت گرماگذاری، نانوذرات نقره کروی با میانگین اندازهی 24 تا 38 نانومتر بهصورت برون سلولی و تحت استراتژی سلول در حال استراحت سنتز می نماید. نانوذرات نقره عنصری کروی سنتز شده، دارای ماهیت کریستالی، اندازهی نسبتا کوچک و پایداری بالا به علت پوشش دهی توسط پروتئینهای ترشح شده از قارچ هستند.
بیوتکنولوژی
شیرین جمشیدی؛ محمد حسن زاده صابر؛ مریم منصف شکری
چکیده
مقدمه:تشخیص گونه تاسماهیان، عدم آمیختگی خاویار چندگونه در محصولات تهیه شده از خاویار تاسماهیان از چالش های بسیار مهم در تجارت قانونی و بین المللی این محصولات می باشد. یکی از روش های شناسایی خاویار اصل و برچسب گذاری صحیح محصولات خاویار، استفاده از بارکدها و به ویژه ردیابی با بارکد مولکولی می باشد. روش ها: در این تحقیق برای بررسی نشانگرهای ...
بیشتر
مقدمه:تشخیص گونه تاسماهیان، عدم آمیختگی خاویار چندگونه در محصولات تهیه شده از خاویار تاسماهیان از چالش های بسیار مهم در تجارت قانونی و بین المللی این محصولات می باشد. یکی از روش های شناسایی خاویار اصل و برچسب گذاری صحیح محصولات خاویار، استفاده از بارکدها و به ویژه ردیابی با بارکد مولکولی می باشد. روش ها: در این تحقیق برای بررسی نشانگرهای تشخیص گونه ای تاسماهیان دریای کاسپین از نمونه های بافت باله تاسماهی روسی، ایرانی، شیپ، استرلیاد، ازون برون و فیلماهی خالص دریای کاسپین، استرلیاد و تاسماهی سیبری و همچنین نمونه خاویار آنها استفاده شد. استخراج DNA از سه عدد دانه خاویار از هر گونه و بافت باله تاسماهی خالص انجام شد و دو نوع آغازگر بر اساس ژن های میتوکندریایی انتخاب شد.نتایج و بحث: نشانگر تاسماهیان با استفاده از روش PCR یک قطعه 138 نو کلئوتیدی را در تمامی گونه ها بر اساس ژن COI تکثیر کرد اما نشانگر گونه ای قطعاتی با اندازه های متفاوت بر اساس ژن D-loop را تکثیر کرد. این قطعات هم در خاویار و هم بافت باله تاسماهیان تکثیر شد. نتایج کلی نشان داد که تکثیر قطعات نشانگر تاسماهیان و نشانگر گونه ای در تاسماهیان خالص می تواند نشان دهنده خالص بودن گونه باشد.
بیوتکنولوژی
پریسا تاجر محمد قزوینی؛ زهرا شیری یکتا؛ شقایق نصر؛ نرگس اسلامی؛ منصوره السادات حسینی
چکیده
مقدمه: اورانیوم به عنوان یکی از فلزات سنگین، یک رادیونوکلئید طبیعی است که به دلیل سمیت جدی و خاصیت پرتوزایی دارای اثرات مخرب بر روی سلامت انسان و محیط زیست میباشد. جذب زیستی یک فناوری ساده و مقرون به صرفه است که میتواند برای حذف فلزات سنگین و رادیونوکلئیدها از پسابها به کار گرفته شود. مواد و روشها: در این پژوهش، زیست توده میکروکوکوس ...
بیشتر
مقدمه: اورانیوم به عنوان یکی از فلزات سنگین، یک رادیونوکلئید طبیعی است که به دلیل سمیت جدی و خاصیت پرتوزایی دارای اثرات مخرب بر روی سلامت انسان و محیط زیست میباشد. جذب زیستی یک فناوری ساده و مقرون به صرفه است که میتواند برای حذف فلزات سنگین و رادیونوکلئیدها از پسابها به کار گرفته شود. مواد و روشها: در این پژوهش، زیست توده میکروکوکوس لوتئوس پیش تیمار شده با حرارت اتوکلاو استفاده گردید. سپس پارامترهای فیزیکوشیمیایی موثر بر جذب زیستی اورانیوم شامل دما، pH، غلظت اولیه اورانیوم و غلظت جاذب با استفاده از روش سطح پاسخ بررسی شدند. نتایج: نتایج نشان داد که پارامترهای غلظت اولیه اورانیوم، مقدار جاذب و pH از لحاظ آماری (05/0>p-value ) بر روی فرآیند جذب زیستی اورانیوم تأثیرگذار هستند. در مقابل، پارامتر دما از لحاظ آماری (05/0>p-value) بر روی فرآیند حذف اورانیوم توسط باکتری میکروکوکوس لوتئوس بدون تأثیر میباشد. بحث و نتیجهگیری: نتایج مشخص کردند که زیست توده پیش تیمار شده در شرایط پیشنهاد شده توسط نرمافزار دیزاین اکسپرت (75/19 گرم بر لیتر زیست توده، دمای °C 14/32 و 33/3pH ) قادر به حذف تقریباً 98/99 درصد اورانیوم از محیط آلوده به 11/26 میلی گرم بر لیتر اورانیوم می باشد که نشان دهنده پتانسیل ارزشمند آن در کاربردهای زیست پالایی اورانیوم از پسابهای اسیدی آلوده با غلظت های پایین اورانیوم میباشد.
بیوتکنولوژی
محسن فکوری؛ محمد تقی خراسانی؛ مهدی کمالی دولت آبادی
چکیده
مقدمه: پلیاتیلن با وزن مولکولی فوقالعاده بالا (UHMWPE) به علت خواص فیزیکی و شیمیایی فوقالعاده، طی سه دههی اخیر بهعنوان ماده انتخابی در پروتزهای تعویض مفاصل استفاده شده است. بااینوجود، سایش و اکسیداسیون این پلیمر در درازمدت منجر به استئولیز (تخریب استخوان) و محدودکردن طول عمر این پروتز میشود. یکی از روشهای موثر جهت جلوگیری ...
بیشتر
مقدمه: پلیاتیلن با وزن مولکولی فوقالعاده بالا (UHMWPE) به علت خواص فیزیکی و شیمیایی فوقالعاده، طی سه دههی اخیر بهعنوان ماده انتخابی در پروتزهای تعویض مفاصل استفاده شده است. بااینوجود، سایش و اکسیداسیون این پلیمر در درازمدت منجر به استئولیز (تخریب استخوان) و محدودکردن طول عمر این پروتز میشود. یکی از روشهای موثر جهت جلوگیری از اکسیداسیون، استفاده از α-توکوفرول در ماتریس UHMWPE است. اما حضور این افزودنی به تنهایی باعث بهبود عملکرد مکانیکی UHMWPE نمی شود. از طرف دیگر استفاده از نانوتیوبهای کربنی چند دیواره (MWCNTs) به دلیل خواص استثنایی مانند مدول الاستیک و نسبت سطح به حجم بالا،نشان داده شده است که می توانند موجب بهبود خواص مکانیکی شوند. با این وجود پیدا کردن مقادیر بهینه استفاده از MWCNTs و ویتامین E به صورت همزمان جهت بهبود خواص مکانیکی این پلیمر بسیار حیاتی و مهم است.روشها: در این پژوهش جهت بررسی و مقایسة تاثیر نانوتیوبهای کربنی بر خواص کامپوزیت UHMWPE حاوی ویتامین E، دو کامپوزیت، یکی حاوی 0.2 درصد وزنی ویتامین E و دیگری حاوی 0.25 درصد وزنی ویتامین E به همراه 0.5 درصد وزنی MWCNT تولید شدند. نتیجه و بحث: طیفسنجی مادونقرمز تبدیل فوریه (FTIR) افزایش پیکهای مشخصه ی کامپوزیت PE-E/CNT را نسبت به کامپوزیت PE-E گزارش داد. گرماسنجی روبشی تفاضلی (DSC) افزایش حدود 7 درصدی بلورینگی را در کامپوزیت PE-E/CNT گزارش داد. آنالیز حرارتی مکانیکی دینامیکی (DMTA) نیز بهبود خواص الاستیک را در کامپوزیت PE-E/CNT نسبت به کامپوزیت حاوی ویتامین E نشان داد.
بیوتکنولوژی
طیبه هادی توران پشتی؛ فخری السادات حسینی؛ فاطمه صفاخواه
چکیده
مقدمه: میکروجلبکها ارگانیسمهایی با متابولیتهای متنوع و با ارزش هستند و دو میکروجلبک اسپیرولینا و کلرلا به دلیل دارا بودن مقادیر بالای پروتئین بسیار مورد توجه قرار گرفتهاند.روش کار: در این مطالعه پس از کشت میکروجلبکهای اسپیرولینا و کلرلا، از آنها عصارهگیری شد و همچنین به وسیله سونیکاتور پروتئین آنها استخراج شده و تحت ...
بیشتر
مقدمه: میکروجلبکها ارگانیسمهایی با متابولیتهای متنوع و با ارزش هستند و دو میکروجلبک اسپیرولینا و کلرلا به دلیل دارا بودن مقادیر بالای پروتئین بسیار مورد توجه قرار گرفتهاند.روش کار: در این مطالعه پس از کشت میکروجلبکهای اسپیرولینا و کلرلا، از آنها عصارهگیری شد و همچنین به وسیله سونیکاتور پروتئین آنها استخراج شده و تحت هیدرولیز آنزیمی با دو آنزیم آلکالین پروتئاز و پپسین قرار گرفتند و با استفاده از تست DPPH خاصیت آنتی اکسیدانی آنها مورد سنجش قرار گرفت. همچنین خاصیت ضد تکثیری پروتئینهای میکروجلبکهای اسپیرولینا و کلرلا قبل و بعد از هیدرولیز آنزیمی با دو لاین سلولی سرطانی MCF-7 و Caco-2 و خاصیت ضد میکروبی با دو باکتری اشریشیاکلی و استافیلوکوکوس اورئوس مورد سنجش قرار گرفت. نتیجه: میزان زنده مانی سلولهای سرطانی MCF-7پس از تیمار 48 ساعته با غلظت 200میکروگرم بر میلی لیتر پروتئین هیدرولیز شده اسپیرولینا و کلرلا به ترتیب 60/21 درصد و 65/37 درصد و این میزان برای سلول سرطانی Caco-2 به ترتیب 63/23 درصد و 48/26 درصد کاهش یافته است. همچنین نتایج نشان داد که هیدرولیز پروتئین در بهبود خواص آنتی اکسیدانی، ضد تکثیری و ضد میکروبی تأثیر مثبت داشته است.
بیوتکنولوژی
مریم صلواتی فر
چکیده
فناوری آنتی بادیهای نوترکیب، تولید و کاربرد این نوع آنتی بادیها را متحول نموده و برخی محدودیتهای فناوری هیبریدوما را مرتفع نمود. آنتی بادیهای مونوکلونال توانایی بالایی به عنوان عوامل تشخیصی، درمانی و به ویژه هدف قراردادن سلولهای سرطانی دارند، اما کاربرد آنها به واسطه اندازه بزرگشان با محدودیتهایی مواجه است. ساختار نواحی ...
بیشتر
فناوری آنتی بادیهای نوترکیب، تولید و کاربرد این نوع آنتی بادیها را متحول نموده و برخی محدودیتهای فناوری هیبریدوما را مرتفع نمود. آنتی بادیهای مونوکلونال توانایی بالایی به عنوان عوامل تشخیصی، درمانی و به ویژه هدف قراردادن سلولهای سرطانی دارند، اما کاربرد آنها به واسطه اندازه بزرگشان با محدودیتهایی مواجه است. ساختار نواحی آنتی بادی امکان تقسیم بندی آنها را به زیر واحدهای کارا فراهم میسازد که این بخشها میتوانند با ترکیب شدن و اتصالات مختلف، مولکولهای جدید کارآمدی را ایجاد نمایند. مولکولهای scFvنسبت به آنتی بادی اولیه، به دلیل کاهش اندازه مزایای بسیاری دارند که مهمترین آنها، کاهش پاسخهای ایمنی نسبت به آنتی بادی کامل موشی به واسطه فقدان بخشهای ثابت میباشد. در این تحقیق ژن نواحی متغیر آنتی بادی مونوکلونال ضد مارکر توموری کارسینوامریونیک به صورت scFV ساخته شده و در ناقل فاژمیدی کلون شده و سپس بیان گردید. همچنین اختصاصیت آن توسط آزمون وسترن بلاتینگ بررسی شد. طبق نتایج حاصله ژن scfv با موفقیت ساخته شد. سپس کلونینگ و بیان آن انجام پذیرفت. در نهایت اختصاصی بودن آن نسبت به مارکر توموری کارسینوامریونیک، با وسترن بلاتینگ تائید گردید. آنتی بادی نوترکیب scFV بیان شده در این پژوهش، علی رغم کاهش اندازه، به طور اختصاصی قادر به شناسی آنتیژن بود و از اینرو میتوان از آن در تشخیص و پایش برخی سرطانها استفاده نمود. در مجموع ، از این روش می توان برای سنتز آنتی بادی های نوترکیب نوع scFV علیه سایر آنتی ژنها استفاده کرد و از آنها در تستهای مختلف تشخیصی و درمانی بیماریها استفاده نمود.
بیوتکنولوژی
سمیرا میرزائی؛ هاله الوندی؛ علی حسین رضایان؛ یاسمین بیده؛ غلامحسین ریاضی؛ مهدی ضرابی
چکیده
مقدمه: بیومیمتیک به معنی تقلید از مدلها، سیستمها و عناصر طبیعت با هدف حل مشکلات پیچیده انسان است. این علم منجر به ایجاد فناوریهای جدید با الهام از راهحلهای زیستی در اندازههای ماکرو و نانو شده است. هر ساله هزاران نفر به دلیل بیماریهای ناشی از مقاومت باکتریها به آنتیبیوتیک جان خود را از دست میدهند. از این رو استفاده ...
بیشتر
مقدمه: بیومیمتیک به معنی تقلید از مدلها، سیستمها و عناصر طبیعت با هدف حل مشکلات پیچیده انسان است. این علم منجر به ایجاد فناوریهای جدید با الهام از راهحلهای زیستی در اندازههای ماکرو و نانو شده است. هر ساله هزاران نفر به دلیل بیماریهای ناشی از مقاومت باکتریها به آنتیبیوتیک جان خود را از دست میدهند. از این رو استفاده از پپتیدهای ضدمیکروبی اهمیت ویژهای یافته است. در این پروژه از پلیمر پلی اتیلن ایمین پرشاخه با وزن مولکولی پایین به عنوان پلیمر زیست تقلیدی از پپتیدهای ضد باکتریایی استفاده شده است. روشها: به منظور افزایش خاصیت ضد باکتریایی از آمینواسید والین و لیزین برای اصلاح سطح پلیمر پلی اتیلن ایمین پرشاخه استفاده شد. برای اثبات اتصال آمینواسیدها به پلیمر از1H-NMR و FTIR استفاده شد. فعالیت ضدباکتریایی پلیمر اصلاحی با دو روش تست MIC و هاله عدم رشد روی باکتریهای گرم مثبت استافیلوکوکوس اورئوس و باسیلوس سوبتیلیس و باکتریهای گرم منفی اشرشیا کلای و سودوموناس آئروژینوزا بررسی شد. نتیجه و بحث: غلظت بهینه پلیمر پلی اتیلن ایمین پرشاخه 8 میکرولیتر و نسبت آمینواسید والین:لیزین، 1:6 بود. پلیمر پلیاتیلن ایمین اصلاح شده با آمینواسیدهای والین و لیزین به صورت وابسته به غلظت رشد باکتریها را مهار کرد (p<0.05). 5 میلیگرم بر میلیلیتر این پلیمر رشد باکتریها را بیش از 70% مهار کرد. همچنین قطر هاله عدم رشد این پلیمر در باکتریهای مورد بررسی بین 15-20 میلیمتر بود. فعالیت ضدباکتریایی این پلیمر با آنتیبیوتیک سفپیم قابل مقایسه بود. به نظر میرسد این پلیمر میتواند به عنوان پلیمری ضدباکتریایی مورد استفاده قرار گیرد.
بیوتکنولوژی
فائزه قناتی؛ نرجس محمدی بلکوتی؛ سعیده وزیری فر
چکیده
سینامیک اسید، کوماریک اسید ، فرولیک اسید ، کافئیک اسید از جمله مشتقات هیدروکسی سینامیک اسید هستند. این ترکیبات فنلی دارای خواص آنتی اکسیدانی قوی هستند. گزارشات اندکی در مورد محتوا و نوع آنها در قارچهای اندوفیت ثبت شده است. تحقیق حاضر به شناسایی و معرفی قارچهای اندوفیت از گیاه فندق (Corylus avellana) و نوع و محتوای اسیدهای فنلی آنها پرداخته ...
بیشتر
سینامیک اسید، کوماریک اسید ، فرولیک اسید ، کافئیک اسید از جمله مشتقات هیدروکسی سینامیک اسید هستند. این ترکیبات فنلی دارای خواص آنتی اکسیدانی قوی هستند. گزارشات اندکی در مورد محتوا و نوع آنها در قارچهای اندوفیت ثبت شده است. تحقیق حاضر به شناسایی و معرفی قارچهای اندوفیت از گیاه فندق (Corylus avellana) و نوع و محتوای اسیدهای فنلی آنها پرداخته است. شناسایی مولکولی قارچها براساس آغازگرهای ITS، حضور و مقدار تولید مشتقات سینامیک اسید به روش HPLC انجام شد. 12 قارچ اندوفیت سنتز کننده اسیدهای فنلی شناسایی و مقدار تولید هر کدام از ترکیبات ذکر شده در محیط درون سلولی و برون سلولی اندازهگیری شد. قارچAlternaria sp. بیشترین مقدار سینامیک اسید و کافئیک اسید(به ترتیب g/g Fwµ 303 وg/g Fwµ 17) را تولید کرد. همچنین درصد رهاسازی اسیدهای فنلی به محیط در دو قارچ Fusarium sp. وsp. Stemphylium صد در صد بود که حاکی از آسانی و راندمان بالا در فرایند استخراج در مقیاس تجاری میباشد.
بیوتکنولوژی
الهه میرزایی دلبری؛ جعفر وطن دوست؛ متین جامی معینی؛ عیسی کهن باغخیراتی
چکیده
مقدمه: تراریختسازی میانجیگری شده توسط آگروباکتریوم، یک فن آوری کارآمد برای القای ریشه های مویین میباشد. در پژوهش حاضر، اثر سویه اگروباکتریوم رایزوژنز و نوع ریزنمونه بر القای ریشه مویین در گیاه یونجه بررسی گردید. روشها: آزمایش به صورت فاکتوریل در قالب طرح کاملاً تصادفی با سه تکرار در دانشگاه آزاد اسلامی واحد سبزوار انجام شد. ...
بیشتر
مقدمه: تراریختسازی میانجیگری شده توسط آگروباکتریوم، یک فن آوری کارآمد برای القای ریشه های مویین میباشد. در پژوهش حاضر، اثر سویه اگروباکتریوم رایزوژنز و نوع ریزنمونه بر القای ریشه مویین در گیاه یونجه بررسی گردید. روشها: آزمایش به صورت فاکتوریل در قالب طرح کاملاً تصادفی با سه تکرار در دانشگاه آزاد اسلامی واحد سبزوار انجام شد. فاکتورهای آزمایشی شامل سویه اگروباکتریوم رایزوژنز در چهار سطح A13، 318، 15834و A4 و نوع ریزنمونه در دو سطح ریزنمونه برگ و هیپوکوتیل بودند. نتایج و بحث: بیشترین درصد القای ریشه مویین، در ریزنمونههای برگ تلقیح شده با سویه باکتریایی A4 به دست آمد که به طور معنیداری بیشتر از سایر سویههای اگروباکتریوم رایزوژنز بود. تلقیح با سویه باکتریایی 318، باعث کمترین القای ریشه مویین در ریزنمونههای برگ و هیپوکوتیل گردید. سویههای باکتریایی A13 و 15834 به ترتیب بیشترین تعداد ریشه مویین در ریزنمونههای برگ و هیپوکوتیل را تولید نمودند. کمترین تعداد ریشه مویین در ریزنمونههای برگ نیز در شرایط تلقیح با سویه 318 تولید گردید. بیشترین و کمترین طول ریشه مویین در ریزنمونههای برگ، به ترتیب در شرایط تلقیح با سویههای باکتریایی A4 و 318 مشاهده شد. در ریزنمونه های هیپوکوتیل، تفاوت معنیداری بین سویههای مختلف اگروباکتریوم رایزوژنز در رابطه با تعداد و طول ریشه مویین وجود نداشت. نتایج حاصل از تفکیک محصولات واکنش PCR و آشکارسازی باندها، حضور ژن rolB در ژنوم سلولهای ریشههای مویین را تأیید نمود. با توجه به نتایج، استفاده از ریزنمونه برگ همراه با سویه A4 اگروباکتریوم رایزوژنز جهت تولید ریشه-های مویین در گیاه یونجه قابل توصیه میباشد.
بیوتکنولوژی
ندا سینائی؛ داود زارع؛ مهرداد آذین
چکیده
پلیهیدروکسی آلکانواتها پلیمرهایی زیستتخریبپذیر و زیستسازگار هستند که توسط طیف گستردهای از سویههای باکتریایی تولید میشوند. در پژوهش حاضر، از سویه طبیعی باکتری Bacillus cereus تولید کننده کوپلیمر پلیهیدروکسی بوتیرات-کو-والرات (PHBV) با بهرهوری تولید بالا جداسازی شده از پساب نشاسته استفاده گردید. به منظور تولید، پساب نشاسته ...
بیشتر
پلیهیدروکسی آلکانواتها پلیمرهایی زیستتخریبپذیر و زیستسازگار هستند که توسط طیف گستردهای از سویههای باکتریایی تولید میشوند. در پژوهش حاضر، از سویه طبیعی باکتری Bacillus cereus تولید کننده کوپلیمر پلیهیدروکسی بوتیرات-کو-والرات (PHBV) با بهرهوری تولید بالا جداسازی شده از پساب نشاسته استفاده گردید. به منظور تولید، پساب نشاسته بعنوان یک محیط کشت ارزانقیمت بررسی شد. در ادامه با بررسی عوامل مؤثر، ترکیب بهینه محیط کشت ارزیابی و به منظور دستیابی به بهرهوری بالاتر، روش کشت با تراکم بالای سلولی ارزیابی گردید. نتایج نشان داد که میانگین حداکثر تولید PHBV با استفاده از روش طراحی آزمایش پلاکت-برمن (عوامل مرتبط با محیط کشت)، حدود g/l 07/3 (5/59% وزن خشک سلول) است. در ادامه با بهینه سازی کشت با تراکم بالای سلولی، میزان تولید به مقدار g/l 45/4 (بیش از 72% وزن خشک سلول) افزایش یافت. بنابراین میتوان چنین نتیجه گیری کرد که روش کشت سلولی با تراکم بالا تاثیر معناداری بر بالا بردن بهرهوری تولید PHBV توسط سویه B. cereus دارد. با توجه به بکارگیری محیط کشت ارزانقیمت پساب، اهمیت این نتایج دو چندان بوده و پتانسیل تولید در مقیاس صنعتی را نشان میدهد.
بیوتکنولوژی
یونس بیگی خسروشاهی؛ مریم حسینی
چکیده
استفاده وسیع سلولهای بنیادی برای کاربردهای درمانی، نیاز به تولید مکرر تعداد زیادی از سلولها با خصوصیات مناسب تحت شرایط کنترل شده در بیوراکتورها دارد. در این تحقیق سلول هایU937 به عنوان مدلی از سلول های بنیادی شناور در داخل میکروکپسول های آلژینات-ژلاتین با دانسیته سلولی Cells/ml 106× 5/2 قرار گرفتند. میکروکپسول ها در دو بیوراکتور پرفیوژن ...
بیشتر
استفاده وسیع سلولهای بنیادی برای کاربردهای درمانی، نیاز به تولید مکرر تعداد زیادی از سلولها با خصوصیات مناسب تحت شرایط کنترل شده در بیوراکتورها دارد. در این تحقیق سلول هایU937 به عنوان مدلی از سلول های بنیادی شناور در داخل میکروکپسول های آلژینات-ژلاتین با دانسیته سلولی Cells/ml 106× 5/2 قرار گرفتند. میکروکپسول ها در دو بیوراکتور پرفیوژن با لوپ همزن خارجی و ستونی حبابدار کشت داده شدند. نتایج بدست آمده افزایش 0.9±9.2 سلول ها در راکتور پرفیوژن با همزن خارجی را نشان داد در حالی که به دلیل تنش بالا قادر به رشد مناسب در راکتور ستونی حبابدار نبودند. نتایج بدست آمده تایید کننده مناسب بودن میکرو کپسول های آلژینات-ژلاتینی جهت تکثیر سلولهای بنیادی در سیستمهای دینامیک میباشد. برای این منظور بیوراکتور پرفیوژن با لوپ همزن خارجی با کاهش تنش برشی و پخش بهتر اکسیژن، محیط همگن و مناسبتری را برای رشد و تکثیر سلولها ایجاد مینماید.