جداسازی و شناسایی Staphylococcus pasteuri تولید کننده آنزیم فیتاز از ریزوسفر گندم

نوع مقاله: مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 استادیار بیوتکنولوژی، دانشگاه الزهراء، تهران، ایران

2 کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی میکروبی، دانشگاه الزهراء، تهران، ایران

3 دانشیارفیزیولوژی گیاهی، دانشگاه الزهراء، تهران، ایران

چکیده

فیتازها آنزیم‌هایی هستند که قادر به هیدرولیز اسیدفیتیک به مشتقات میو- اینوزیتول کمتر فسفریله شده می-باشند. اسیدفیتیک شکل اصلی ذخیره فسفات در گیاهان است. حیوانات تک معده‌ای مانند خوک ، مرغ و ماهی قادر به متابولیزه کردن اسیدفیتیک نیستند. اضافه کردن فیتاز به جیره غذایی حیوانات تک معدی منجر افزایش دسترسی فسفر می-گردد. در این پژوهش، هدف جداسازی و شناسایی باکتری‌های مولد فیتاز از ریزوسفر گندم بود. باکتری‌های مولد فیتاز با ایجاد هاله شفاف اطراف کلنی‌ها در محیط حاوی فیتات سدیم شناسایی و بهترین سویه مولد فیتاز از طریق روش‌های مولکولی شناسایی شد. همچنین توانایی جدایه بدست آمده در حل کردن فسفات معدنی تری‌کلسیم‌فسفات در محیط NBRIP بررسی گردید. از میان 11 سویه‌ایی که قادر به ایجاد هاله شفاف بر روی محیط PSM بودند، جدایه Staphylococcus pasteuri دارای توانایی بالایی در تولید آنزیم فیتاز بود. طبق نتایج بدست آمده می-توان عنوان کرد باکتری Staphylococcus pasteuriقادر به تولید آنزیم فیتاز و فسفاتاز می‌باشد.

کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله [English]

Isolation and Identification of Phytase Producing Staphylococcus pasteuri from Rhizosphere of Wheat

نویسندگان [English]

  • jamshid fooladi 1
  • nashmin fayazi hossini 2
  • khadijeh kiarostami 3

1 Assistant Professor of Biology, Alzahra University, Tehran, Iran

2 Department of biology, Faculty of basic sciences, Alzahra university, Tehran,Iran

3 Phd dissertational Phylosophy, Alzahra University, Tehran, Iran

چکیده [English]

Phytases are enzymes capable of hydrolyzing phytic acid to less-phosphorylated myo-inositol derivates. Phytic acid The major storage form of phosphorous in plants. Monogastric animals, such as pig, poultry and fish are not able to metabolize phytic acid. Adding phytase to diet monogastric animals lead to increased avalibility of phosphorus. The objective of the present study is to isolate and characterize phytase producing bacterial strains from rhizosphere of wheat. Phytase production was determined by production of clear zones around the colonies on the sodium phytate containing medium and the best phytase producing strain was identified using molecular analysis. Also, the isolate was tested for P-solubilizing potential using National Botanical Research Institute Phosphate (NBRIP) containing tricalcium phosphate as the sole P source. Among the 11 bacterial isolates, forming clear peripheral zones on a turbid agar plate, Staphylococcus pasteuri isolated able high potential for phytase production.This study showed that , Staphylococcus pasteuri capable production phytase and phosphatase enzyme.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Phosphatase
  • phytase
  • rhizosphere
  • Staphylococcus pasteuri
  • wheat

Anna, K., Elmar, P. Timmy, S., Jorg, P., Christian, Q., Matthias, H. and Frank, O.G (2012) Evaluation of general 16S ribosomal RNA gene PCR primers for classical and nextgeneration sequencing-based diversity studies. Nucleic Acids Research Advance Access published 1-11

 Bae, H.D., Yank, L.J., Cheng, K.J. and Selinger, L.B (1999) A novel staining method for detecting phytase activity. Journal of microbiological methods 39(1): 17-22.

 Collins, C.H., Lyne, P.M., Grange, J.M. (1989) Microbiological methods 6th., Butterworth, London. Graf, E., Empson, K.L., Eaton, J.W (1987) Phytic acid. A natural antioxidant. Journal of Biological Chemistry 262(24): 11647-11650.

 Holt, J., Kreig, N., Sneath, P. Staley, T., and Williams, S. (1994) Bergey›s manual of determinative bacteriology, 9th ed pp.532-553.

 Hosseinkhani, B. and G. Hosseinkhani (2009) Analysis of phytase producing bacteria (Pseudomonas sp.) from poultry faeces and optimization of this enzyme production.African Journal of Biotechnology 8(17).

 Hussin, A. S. M., Farouk, A-E., Greiner, R., Salleh, H.M. and Ismail, A.F. (2007) Phytate- degrading enzyme production by bacteria isolated from Malaysian soil.World Journal of Microbiology and Biotechnology 23(12): 1653-1660.

 Kapri, A. and L. Tewari (2010) Phosphate solubilization potential and phosphatase activity of rhizospheric Trichoderma spp. Brazilian Journal of Microbiology 41(3): 787-795.

 Lambrechts, C., Boze, H., Mouline, G., Galzye, P. (1992) Utilization of phytate by some yeasts. Biotechnology letters 14(1): 61-66.

 Lopez, H. W, Leenhardt, F., Coudray, C. and Remesy, C. (2002) Minerals and phytic acid interactions: is it a real problem for human nutrition? International journal of food science & technology 37(7): 727-739.

 Mehlich, A. (1953) Determination of P, Ca, Mg, K, Na, and NH4. North Carolina Soil Test Division Publ 1-53.

 Mudryk, Z. (2004) Decomposition of organic and solubilisation of inorganic phosphorus compounds by bacteria isolated from a marine sandy beach. Marine Biology 145(6): 1227-1234.

 Mukesh, P., Suma, S., Singaracharya, M.A. and Lakshmipathi, V (2004) Isolation of phytate-hydrolysing microbial strains from traditional waste water of rice fermentation and liquid cattle feeds. World Journal of Microbiology and Biotechnology

20(5): 531-534.

 Olstorpe, M., Schnurer, J. and Passoth, V (2009) Screening of yeast strains for phytase activity. FEMS Yeast Res 9(2009)478-488.

 Quan, C., Zhang, L., Wang, Y. and Ohta, Y. (2001) Production of phytase in a low phosphate medium by a novel yeast Candida krusei. Journal of bioscience and bioengineering 92(2): 154-160.

Rashid, M., Khalil, S., Ayub, N., Alam, S. and Latif, F (2004) Organic acids production and phosphate solubilization by phosphate solubizing microorganisms (PSM )under in vitro conditions. Pakistan Journal of Biological Sciences 7(2): 187-196.

 Reddy, N. R., Pierson, M.D., Sathe, S.K. and Salunkhe, D.K. (1989) Phytates in cereals and legumes, CRC Press, Florida. Sasirekha, B., Bedashree, T. and Champa, K.L. (2012) Optimization and partial purification of extracellular phytase from Pseudomonas aeruginosa p6. European Journal of Experimental Biology 2(1): 95-104.

 Singh, N. K., Joshi, D.K. and Gupta, R.K. (2013) Isolation of phytase producing bacteria and optimization of phytase production parameters. Jundishapur J. Microbiol 6(5): e6419.

 Sreedevi, S. and B. Reddy (2012) Isolation, Screening and Optimization of Phytase Production from newly isolated Bacillus sp. c43. International Journal of Pharma and Bio Sciences 2(2): 218-231.

 Sumengen, M., Dincer, S. and Kaya, A. (2012) Phytase production from Lactobacillus brevis. Turkish Journal of Biology 36(5).

 Tamura, D.(2007) MEGA4: Molecular evolutionary genetics analysis (MEGA) software version 4.0. Molecular Biology and Evolution 24(8):1596-9.

 Vohra, A. and T. Satyanarayana (2001) Phytase production by the yeast, Pichia anomala.Biotechnology letters 23(7): 551-554.